MyAction Lung Liquid

1. Клінічні покази до проведення дослідження

MyAction Lung Liquid — молекулярно-генетичне дослідження циркулюючої пухлинної ДНК (цпДНК), виділеної з плазми венозної крові, методом секвенування наступного покоління (NGS). Панель призначена для визначення генетичних змін, що можуть впливати на вибір таргетної терапії при недрібноклітинному раку легень (НДРЛ), насамперед при поширеному або метастатичному захворюванні.

Дослідження може застосовуватися як альтернатива або доповнення до тканинного молекулярного профілювання в окремих клінічних ситуаціях, зокрема за недостатньої кількості або недоступності пухлинного матеріалу.

Дослідження може розглядатися за призначенням лікаря в таких клінічних випадках:

• первинне молекулярне профілювання підтвердженого поширеного або метастатичного НДРЛ до вибору системної терапії, коли пухлинної тканини недостатньо, її отримання неможливе або проведення біопсії пов’язане з додатковими ризиками;
• доповнення тканинного молекулярного тестування, якщо важливо оцінити кілька потенційних терапевтичних мішеней, а результати тканинного аналізу є неповними або неінформативними;
• пошук окремих молекулярних механізмів набутої резистентності при прогресуванні захворювання на тлі таргетної терапії, у межах переліку змін, що охоплює панель;
• коли повторна біопсія пухлини недоступна або відтерміновує отримання молекулярної інформації, необхідної для визначення лікувальної тактики.

Важливо: дослідження цпДНК не замінює патогістологічного підтвердження раку легень і не є скринінговим тестом для людей без встановленого онкологічного захворювання. Негативний результат у плазмі не виключає наявності генетичних змін у пухлинній тканині; за можливості слід розглянути тканинне тестування.

2. Матеріал і вимоги

Тип біологічного матеріалу: венозна кров, 10 мл у спеціалізованій пробірці для стабілізації позаклітинної ДНК.

Зберігання та транспортування: температурний режим і максимальний час доставки визначають відповідно до типу пробірки та валідованого протоколу CSD LAB. Необхідно уникати перегрівання, заморожування та порушення встановлених умов зберігання.

Підготовка до дослідження

• за 2 години до забору крові рекомендовано прийняти їжу;
• не вживати алкоголь за 2–3 дні до дослідження;
• після завершення курсу антибіотикотерапії повинно пройти не менше 2 тижнів;
• лікарю бажано зазначити діагноз, попередні результати молекулярних досліджень, отриману протипухлинну терапію та мету тестування — первинне профілювання або оцінювання резистентності;
• за можливості час відбору узгоджують із лікарем: під час вираженої відповіді на лікування рівень цпДНК у плазмі може знижуватися.

Умови транспортування

• температура транспортування: +2…+8 °С;
• стабільність зразка: 24–48 годин.

Критерії прийому матеріалу

• венозна кров у передбаченій протоколом пробірці для стабілізації позаклітинної ДНК;
• належне маркування та відповідність ідентифікаційних даних направленню;
• заповнене направлення із зазначенням клінічного діагнозу;
• достатній об’єм матеріалу для виділення позаклітинної ДНК із плазми крові.

Критерії відбракування

• використання пробірки, не передбаченої протоколом дослідження;
• відсутність або невідповідність ідентифікаційних даних;
• недостатній об’єм крові або порушення співвідношення крові та стабілізувального реагенту;
• порушення умов транспортування чи зберігання, що могло вплинути на стабільність позаклітинної ДНК;
• недостатня кількість або неналежна якість виділеної позаклітинної ДНК, що унеможливлює виконання дослідження.

3. Як замовити дослідження

1. Консультація та вибір дослідження

За потреби скористайтеся послугою медико-генетичного консультування — лікар-генетик CSD LAB допоможе визначити доцільність дослідження та підібрати оптимальний тест для конкретного клінічного випадку. Потребу в тестуванні визначає лікар-онколог або інший профільний спеціаліст.

2. Оформлення замовлення

Заповнення направлення із зазначенням клінічного діагнозу, стадії захворювання та мети молекулярного профілювання (первинне тестування або оцінювання можливої резистентності). Необхідно надати наявний патоморфологічний висновок; за наявності — результати попередніх молекулярних досліджень та інформацію про проведене протипухлинне лікування.

3. Відбір біоматеріалу та контроль придатності зразка

Проводять відбір венозної крові у спеціалізовану пробірку для стабілізації позаклітинної ДНК. У лабораторії перевіряють відповідність матеріалу преаналітичним вимогам та оцінюють придатність виділеної позаклітинної ДНК для подальшого аналізу.

4. Отримання результату

Висновок містить перелік виявлених генетичних варіантів із зазначенням їхніх характеристик та клінічної інтерпретації відповідно до типу пухлини й аналітичних можливостей методу.

4. Відбір та передача матеріалу

Для MyAction Lung Liquid використовують венозну кров, відібрану у спеціалізовану пробірку для стабілізації позаклітинної ДНК.

Відбір біоматеріалу можна виконати у відділенні лабораторії CSD LAB або в медичному закладі, який співпрацює з CSD LAB. Після відбору забезпечують належне перемішування крові зі стабілізувальним реагентом відповідно до інструкції до пробірки. Зразок супроводжують заповненим направленням та доставляють до лабораторії з дотриманням встановлених умов зберігання й транспортування.

5. Результат і рішення

Результатом дослідження є молекулярний профіль цпДНК у межах цільової панелі. У висновку зазначають виявлені генетичні варіанти, їхню номенклатуру, алельну частоту (AF, за можливості визначення) та клінічне значення відповідно до типу пухлини.

Алельна частота (AF) відображає частку прочитань ДНК, у яких виявлено конкретний генетичний варіант. Цей показник не є прямим еквівалентом частки пухлинних клітин або кількості пухлинної тканини.

Досліджувані генетичні зміни

• точкові мутації, невеликі інсерції та делеції в 10 генах: EGFR, ALK, ROS1, RET, KRAS, NRAS, PIK3CA, BRAF, HER2 (ERBB2), MET;
• генні злиття за участю ALK, ROS1 та RET;
• зміни, пов’язані з пропуском 14-го екзона гена MET (MET exon 14 skipping).

Можливі варіанти результату

• Виявлено клінічно значущий генетичний варіант: у звіті зазначають відповідний ген, нуклеотидну або білкову зміну чи генне злиття, алельну частоту (за наявності) та її клінічну значущість;
• Не виявлено клінічно значущих варіантів у межах дослідженої панелі та аналітичних можливостей методу;
• Дослідження відхилено. Якщо кількість або якість виділеної позаклітинної ДНК, параметри підготовки бібліотеки чи секвенування не відповідають встановленим критеріям якості, лабораторія не видає молекулярний результат.

Результати дослідження можуть використовуватися для

• уточнення молекулярного профілю поширеного НДРЛ і пошуку змін, важливих для вибору таргетної терапії;
• додаткового молекулярного дослідження за браку пухлинної тканини або після неінформативного тканинного тестування;
• оцінювання можливих механізмів резистентності за прогресування захворювання, якщо відповідні маркери входять до складу панелі;
• обговорення результатів на мультидисциплінарному консиліумі та вибору подальших лабораторних досліджень.

Обмеження: низький рівень цпДНК може призводити до хибнонегативного результату. Рідинна біопсія має нижчу чутливість для окремих генних злиттів і деяких інших типів змін. Відсутність варіанта в плазмі не доводить його відсутності в пухлині. Панель не визначає експресію PD-L1, не встановлює гістологічний тип раку та не є комплексним тестом на всі можливі молекулярні маркери НДРЛ.

6. Методологія та контроль якості (QC)

Метод дослідження: високопродуктивне секвенування наступного покоління (Next-Generation Sequencing, NGS) цільових ділянок позаклітинної ДНК із плазми крові.

Принцип методу: із венозної крові відокремлюють плазму та виділяють позаклітинну ДНК, у складі якої може бути присутня цпДНК. Після підготовки бібліотеки фрагментів виконують секвенування досліджуваних ділянок. Отримані послідовності аналізують біоінформатичними методами для виявлення точкових змін, невеликих інсерцій і делецій, визначених генних злиттів та змін, пов’язаних із пропуском 14-го екзона MET.

Інтерпретація проводиться в межах фактичного охоплення панелі, якості секвенування та валідованих аналітичних порогів лабораторії. Метод не призначений для виявлення всіх можливих генетичних змін у пухлині.

Контроль якості

• контроль достатності та якості виділеної позаклітинної ДНК перед подальшим аналізом;
• оцінювання фрагментації ДНК: у наданому прикладі звіту наведено задовільний результат, підтверджений ампліфікацією контрольного гена під час ПЛР;
• оцінювання придатності бібліотеки та результатів секвенування відповідно до внутрішніх критеріїв лабораторії;
• перевірка якості визначення та інтерпретації генетичних варіантів у межах валідованого алгоритму;
• визначення необхідності повторного дослідження за недостатньої кількості ДНК або неналежної якості результату;
• контроль можливого впливу домішок геномної ДНК клітин крові на якість аналізу позаклітинної ДНК.

Референтні значення: ліміт детекції (LOD) – 5% мутантної ДНК.

7. Суміжні дослідження та комплексні рішення

Часто призначають разом

• M079 — MyControl EGFR (T790M, екзони 18, 19, 20, 21, кров, цпДНК, ПЛР). Цільове визначення мутацій EGFR у циркулюючій пухлинній ДНК. Може застосовуватися для молекулярного моніторингу пацієнтів із НДРЛ, зокрема при прогресуванні захворювання на тлі терапії інгібіторами EGFR та необхідності оцінювання окремих механізмів резистентності.
• M378 — EGFR (моніторинг вторинної мутації після терапії, T790M, ПЛР, кров). Цільове визначення мутації резистентності EGFR T790M. Може розглядатися при прогресуванні НДРЛ після терапії інгібіторами EGFR першого або другого покоління, якщо результат впливатиме на вибір подальшого лікування.
• M082 — MyControl KRAS (кодони 12, 13, 59, 61, 117, 146, кров, цпДНК, ПЛР). Цільове визначення мутацій KRAS у циркулюючій пухлинній ДНК. Може використовуватися для уточнення молекулярного статусу KRAS, зокрема при необхідності оцінювання конкретних мутацій у пацієнтів із НДРЛ.
• M078 — MyControl BRAF (V600, кров, цпДНК, ПЛР). Цільове визначення мутацій BRAF у кодоні 600 за циркулюючою пухлинною ДНК. Може застосовуватися для уточнення молекулярних змін BRAF, зокрема за необхідності підтвердження конкретного варіанта, що має значення для вибору таргетної терапії.

Розширене молекулярне профілювання: комплексні рішення

M065 — FoundationOne Liquid CDx. Комплексне геномне профілювання циркулюючої пухлинної ДНК із венозної крові методом NGS з аналізом 324 генів.

Дослідження дозволяє визначати широкий спектр геномних змін, зокрема мутації, окремі генні перебудови, зміни кількості копій генів, а також оцінювати додаткові біомаркери, зокрема MSI та мутаційне навантаження пухлини (bTMB).

Може розглядатися як альтернатива MyAction Lung Liquid, коли необхідне розширене молекулярне профілювання, пошук додаткових потенційних терапевтичних мішеней або визначення молекулярних механізмів резистентності.

Комплексний підхід рекомендований при

• Первинному молекулярному профілюванні поширеного НДРЛ. MyAction Lung Liquid дозволяє визначати ключові генетичні зміни, пов'язані з можливістю застосування таргетної терапії, за циркулюючою пухлинною ДНК із крові.
• Недостатній кількості або недоступності пухлинного матеріалу для молекулярного аналізу. Рідинна біопсія дозволяє провести генетичне дослідження пухлини без додаткового інвазивного втручання за наявності достатньої кількості циркулюючої пухлинної ДНК.
• Необхідності скоротити кількість інвазивних втручань. Аналіз крові може бути альтернативним способом отримання інформації про молекулярні характеристики пухлини за відповідними клінічними показаннями.
• Прогресуванні захворювання під час таргетної терапії. Повторне дослідження циркулюючої пухлинної ДНК може допомогти виявити нові генетичні зміни, зокрема пов'язані з розвитком резистентності до лікування.
• Потребі в цільовому молекулярному моніторингу. За наявності відомої мутації та конкретного клінічного завдання можуть використовуватися MyControl EGFR, MyControl KRAS, MyControl BRAF або визначення EGFR T790M.
• Потребі в розширеному геномному профілюванні. Якщо обсягу MyAction Lung Liquid недостатньо для вирішення клінічного питання, може розглядатися FoundationOne Liquid CDx, що охоплює 324 гени та додаткові геномні біомаркери.
• Необхідності повторної молекулярної оцінки пухлини. При зміні клінічного перебігу захворювання повторне визначення генетичних змін за циркулюючою пухлинною ДНК може надати інформацію для подальшого планування лікування.

Важливо: MyAction Lung Liquid досліджує молекулярні характеристики пухлини за циркулюючою пухлинною ДНК із крові. Метод може бути альтернативою тканинному молекулярному тестуванню в окремих клінічних ситуаціях, але не замінює морфологічного підтвердження онкологічного діагнозу.

Негативний результат рідинної біопсії не виключає наявності клінічно значущих генетичних змін. Результати інтерпретують з урахуванням кількості циркулюючої пухлинної ДНК, характеристик захворювання та можливостей методу.

Наведені цільові дослідження частково перекриваються з MyAction Lung Liquid і не потребують одночасного призначення без окремих клінічних підстав.

8. Для лікаря: корисні ресурси

Клінічні рекомендації

• ASCO 2026, NCCN 4.2026, ESMO Living Guideline 2026, ESMO NGS 2024.
• ESMO recommendations on the use of circulating tumour DNA assays for patients with cancer: a report from the ESMO Precision Medicine Working Group.

Клінічні дослідження

• B-FAST (NCT03178552). Застосування NGS циркулюючої пухлинної ДНК для виявлення терапевтично значущих генетичних змін.
• ORCHARD (NCT03944772). Молекулярні механізми резистентності після терапії осимертинібом, порівняння результатів плазмового та тканинного NGS.
• LIBRETTO-431 (NCT04194944). Клінічне значення виявлення злиттів RET для вибору терапії.