Транслокація t(11;18) BIRC3(API2)::MALT1 (FISH)
Транслокація t(11;18) BIRC3(API2)::MALT1 (FISH) — це молекулярно-цитогенетичне дослідження для виявлення перебудови між хромосомами 11 і 18, яка призводить до злиття генів BIRC3 та MALT1. API2 — попередня назва гена BIRC3, яка досі використовується в літературі та назвах досліджень. Аналіз виконують методом флуоресцентної гібридизації in situ (FISH).
Злиття BIRC3::MALT1 призводить до утворення гібридного білка, який активує сигнальний шлях NF-κB, залучений до виживання та поділу клітин. Це сприяє підтриманню пухлинного росту.
Транслокація t(11;18) є характерною генетичною зміною при MALT-лімфомі — екстранодальній лімфомі маргінальної зони з лімфоїдної тканини, асоційованої зі слизовими оболонками. Вона зустрічається, зокрема, при MALT-лімфомах шлунка та легень, але наявна не в усіх випадках захворювання.
При MALT-лімфомі шлунка виявлення t(11;18) пов’язане зі зниженою ймовірністю регресії лімфоми після ерадикації Helicobacter pylori. Йдеться про відповідь пухлини на усунення інфекції, а не про визначення стійкості самої бактерії до антибіотиків.
1. Клінічні показання до проведення дослідження
Дослідження призначають гематолог, онколог або лікар-патоморфолог у таких випадках:
- Вперше діагностована MALT-лімфома шлунка — для визначення статусу t(11;18) та планування лікувальної тактики.
- Підозра на MALT-лімфому за результатами гістологічного та імуногістохімічного досліджень — як додатковий молекулярний аргумент для уточнення діагнозу.
- MALT-лімфома іншої локалізації, зокрема легень, — за наявності відповідного діагностичного завдання.
- Збереження MALT-лімфоми шлунка після успішної ерадикації H. pylori, якщо статус транслокації раніше не визначали.
Дослідження доповнює патоморфологічну діагностику та не замінює гістологічного й імуногістохімічного аналізів.
2. Матеріал і вимоги до зразка
| Тип біоматеріалу | Зафіксована у формаліні та залита в парафін тканина лімфатичного вузла або іншого ураженого органа (FFPE-блок), отримана під час біопсії чи операції. |
| Обов'язковий супровід | Разом із блоком обов'язково надається 1 контрольне гістологічне скло (H&E) або замовляється його виготовлення у лабораторії для картування ділянки пухлини. |
| Вимоги до тканини | Вміст пухлинних клітин у зрізі повинен становити 50-100 клітин. Наявність вираженого некротичного компонента або аутолізу знижує інформативність аналізу. Для підготовки тканини рекомендована фіксація у 10% нейтральному забуференому формаліні. |
| Транспортування | Доставка здійснюється при кімнатній температурі (+15…+25 °C) у захисному контейнері. Уникати нагрівання вище +30 °C (призводить до плавлення парафіну). Контейнер має бути щільно закритий та чітко маркований (ПІБ пацієнта, дата народження, анатомічний тип матеріалу). |
Критерії відбракування зразка
Зразок матеріалу може бути відхилено або оцінено як неінформативний через:
- Відсутність або недостатню кількість пухлинних клітин у наданому зрізі (50–100 клітин).
- Неадекватну первинну фіксацію тканини (використання формалінового розчину, тривала фіксація понад 48–72 години або гіпофіксація), що призводить до руйнування ДНК та високого рівня фонової автофлуоресценції.
- Проведення жорсткої декальцинації кісткових біоптатів із застосуванням концентрованих кислот (для кісткових сарком рекомендується використовувати м'які декальцинувальні розчини на основі ЕДТА).
- Відсутність маркування на блоці чи розбіжності з даними у бланку направлення. У такому випадку лабораторія проводить уточнення даних.
Клінічні обмеження
Дослідження спрямоване на виявлення t(11;18)/BIRC3::MALT1. Воно не охоплює всі можливі генетичні зміни, пов’язані з MALT-лімфомою, та не визначає точну послідовність химерного транскрипту.
Відсутність транслокації не виключає MALT-лімфоми та не гарантує її регресії після ерадикації H. pylori. На відповідь впливають також поширеність захворювання, глибина ураження стінки шлунка та інші клінічні характеристики.
3. Як замовити дослідження
| 1 | Консультація Скористайтесь послугою Медико-генетичного консультування — лікар-генетик CSD LAB допоможе підібрати оптимальний тест саме для Вашого клінічного випадку. |
| 2 | Оформлення замовлення У бланку зазначаються попередній патоморфологічний діагноз, локалізація пухлини та клінічна мета дослідження. |
| 3 | Отримання біоматеріалу Пацієнт або його представник отримує заархівований парафіновий блок (FFPE) та контрольне скло (H&E) у патологоанатомічному відділенні за місцем проведення біопсії чи операції. |
| 4 | Передача матеріалу до лабораторії Контейнер із парафіновим блоком, склом та заповненим направленням (разом із копією первинного патоморфологічного висновку) передається до будь-якого лабораторного офісу або відправляється спеціалізованою логістичною службою. |
4. Результат і вплив на лікування
Результат надається у вигляді структурованого молекулярно-цитогенетичного звіту. У висновку зазначається підсумковий статус локусу: транслокацію t(11;18) BIRC3::MALT1 виявлено або не виявлено, а також наводиться кількість аберантних ядер (класичний патерн за наявності транслокації — два злиті жовті сигнали, один окремий зелений та один окремий червоний сигнал) серед проаналізованих пухлинних клітин.
Якщо транслокацію виявлено
Результат підтримує діагноз MALT-лімфоми за наявності відповідних морфологічних та імуногістохімічних ознак. При локалізації у шлунку він вказує на низьку ймовірність контролю лімфоми лише за допомогою ерадикації H. pylori.
Виявлення t(11;18) не є підставою відмовлятися від лікування H. pylori. Результат допомагає лікарю оцінити потребу в додатковому лікуванні лімфоми, зокрема променевій або системній терапії, залежно від стадії та клінічних показань.
Якщо транслокацію не виявлено
Результат не виключає MALT-лімфоми. Подальшу тактику визначають за сукупністю патоморфологічних, ендоскопічних, клінічних та інших результатів.
При MALT-лімфомах інших органів значення транслокації оцінюють з урахуванням локалізації. Висновки щодо відповіді на ерадикацію H. pylori при лімфомі шлунка не переносять автоматично на інші локалізації.
5. Методологія та контроль якості (QC)
| Методологія | Флуоресцентна гібридизація in situ (FISH) на парафінових зрізах із використанням специфічних ДНК-зондів для виявлення злиття BIRC3 та MALT1. Для визначення цієї транслокації застосовують зонди типу Dual-Fusion, які позначають ділянки обох генів різними флуоресцентними мітками. Формування характерних сигналів злиття свідчить про їх зближення внаслідок перебудови. |
| Аналітична процедура | Включає депарафінізацію зрізів, ферментативну протеолізну обробку, ко-денатурацію ДНК-зонда та ДНК мішені, гібридизацію та оцінку сигналів під флуоресцентним мікроскопом з відповідними світлофільтрами. |
| Попередній контроль | Обов'язкове картування (маркування) пухлинної зони на контрольному склі H&E лікарем-патоморфологом перед проведенням гібридизації. |
| Критерії оцінки | Результат визначають за характером сигналів і часткою ядер з аберантним патерном відповідно до валідованого лабораторного порогу для використаного набору зондів BIRC3/MALT1. При прикордонних або нетипових результатах може знадобитися оцінка додаткових клітин чи уточнювальне дослідження. |
Контроль якості
- Преаналітичний переконтроль: оцінка морфології ядер та відсутності значних інгібувальних артефактів фіксації.
- Внутрішній контроль: оцінка сигналів у непухлинних клітинах строми/судин (типовий нормальний патерн у диплоїдному ядрі — два окремі зелені та два окремі червоні сигнали). Якість гібридизації оцінюють за інтенсивністю та чіткістю сигналів, рівнем фонової флуоресценції й відповідністю контрольних клітин очікуваному патерну.
- Експертна верифікація: підрахунок сигналів та остаточна інтерпретація результату виконуються кваліфікованим генетиком із відповідною спеціалізацією.
6. Суміжні тести та пакети
- Діагностична ІГХ 3 категорії складності (визначення органного походження метастазів карцином невизначеного походження (в будь-який орган), пухлини голови та шиї, легень, нирок, наднирників, печінки, підшлункової залози, утворення очеревини та середостіння, головного та спинного мозку; аденоми гіпофіза; визначення гістологічного типу недиференційованих злоякісних пухлин, лімфо- та мієлопроліферативної патології (лімфаденопатії, лімфоми Ходжкіна та неходжкінські, лімфоми шкіри, плазмоклітинні пухлини, мастоцитози, гістіоцитози, мієлопроліферативні захворювання), пухлини кісток, м’яких тканин (включаючи саркоми будь-яких органів, гастроінтестинальні стромальні пухлини, філоїдні пухлини грудної залози)
- Визначення Helicobacter pylori в гістологічному/цитологічному матеріалі
7. Для лікаря: корисні ресурси
- Walewska R. et al. Guideline for the diagnosis and management of marginal zone lymphomas: A British Society of Haematology Guideline. British Journal of Haematology. 2024;204:86–107 — показання до визначення t(11;18) та лікування MALT-лімфоми шлунка.
- Lymphomas: ESMO Clinical Practice Guideline for diagnosis, treatment and follow-up. Annals of Oncology. 2025;36:1263–1284 — сучасні рекомендації щодо діагностики та лікування лімфом, включно з лімфомами маргінальної зони.
- Alaggio R. et al. The 5th edition of the World Health Organization Classification of Haematolymphoid Tumours: Lymphoid Neoplasms. Leukemia. 2022;36:1720–1748 — класифікація лімфоїдних новоутворень.