Амплификация CDK4 (FISH)

Амплификация CDK4 встречается при многих видах опухолей, в том числе у ~90% пациентов с высоко дифференцированной липосаркомой, поэтому данное исследование (FISH) может быть использовано для подтверждения диагноза последней. Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH, от англ. fluorescence in-situ hybridization) – это один из самых современных методов диагностики хромосомных аномалий. Он основан на использовании ДНК-проб, меченных флуоресцентной меткой. ДНК-пробы представляют собой специально синтезированные фрагменты ДНК, последовательность которых комплементарна последовательности ДНК исследуемых аберрантных хромосом. Таким образом, ДНК-пробы различаются по составу: для определения разных хромосомных аномалий используются разные, специфические ДНК-пробы. ДНК-пробы также различаются по размеру: одни могут быть направлены к целой хромосоме, другие – к конкретному локусу. В ходе процесса гибридизации при наличии в исследуемом образце аберрантных хромосом происходит их связывание с ДНК-пробой, которое при исследовании с помощью флуоресцентного микроскопа определяется как флуоресцентный сигнал (положительный результат FISH-теста). При отсутствии аберрантных хромосом несвязанные ДНК-пробы в ходе реакции "отмываются", что при исследовании с помощью флуоресцентного микроскопа определяется как отсутствие флуоресцентного сигнала (отрицательный результат FISH-теста). Метод позволяет оценить не только наличие флуоресцентного сигнала, но и его интенсивность и локализацию. Таким образом, FISH-тест – это не только качественный, но и количественный метод. FISH-тест обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами цитогенетики. В первую очередь, исследование FISH может быть применено как к метафазным, так и к интерфазным ядрам, то есть к неделящимся клеткам. Это основное преимущество FISH по сравнению с классическими способами кариотипирования (например, окрашиванием хромосом по Романовскому-Гимзе), которые применяются только к метафазным ядрам. Благодаря этому исследование FISH является более точным методом для определения хромосомных аномалий в тканях с низкой пролиферативной активностью, в том числе в солидных опухолях.

Зачем назначают исследования?

Исследование предназначается для подтверждения диагноза липосаркомы.

Метод исследования

Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH).

Биоматериал исследования

Гистологический (парафиновые блоки).

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не требует специальной подготовки

Что может повлиять на результат?

Нет данных.

Синонимы

Ампліфікація CDK4 (FISH). Флуоресцентная гибридизация in situ. FISH-тест. FISH-анализ. Fluorescence in-situ hybridization. FISH test.

Что означают результаты? Референтные значения

Результат оценивается как соотношение числа копий гена CDK4 к числу копий 12 хромосомы. FISH-положительным считается образец, в котором соотношение  CDK4:CEP12 больше 2.0. Результат этого исследования оценивают в комплексе с результатами дополнительных лабораторных и инструментальных данных.

Референтные значения:

Cut off: Соотношение количества сигналов CDK4/CEP12>2.

  Кто назначает исследования?

Онколог, акушер-гинеколог, врач-генетик.