ПЛР EGFR
EGFR (epidermal growth factor receptor) — ген, який кодує рецептор епідермального фактора росту. Певні соматичні мутації EGFR активують сигнальні шляхи росту пухлинних клітин і можуть бути клінічно значущими при недрібноклітинному раку легень.
Дослідження EGFR в екзонах 18, 19, 20 і 21 методом ПЛР допомагає виявити мутації, які можуть впливати на вибір таргетної терапії. Різні варіанти EGFR мають неоднакове клінічне значення, тому результат інтерпретує лікар у контексті морфологічного типу пухлини, стадії захворювання, попереднього лікування та результату молекулярно-генетичного дослідження.
- Клінічні покази до проведення дослідження
Дослідження призначає лікар-онколог після морфологічного підтвердження недрібноклітинного раку легень, коли інформація про статус EGFR може вплинути на лікувальну тактику:
- первинне молекулярне тестування пухлини перед вибором системної терапії;
- місцево-поширений або метастатичний недрібноклітинний рак легень;
- повторна молекулярна оцінка при прогресуванні захворювання — за рішенням лікаря та з урахуванням попередньої терапії;
- недостатній обсяг тканини для широкої панелі, коли потрібна швидка оцінка основних екзонів EGFR;
Тест не застосовується для первинного скринінгу раку легень і не замінює морфологічне підтвердження діагнозу.
- Матеріал і вимоги до зразка
| Тип біоматеріалу | Парафіновий блок (FFPE) з пухлинною тканиною або цитологічний матеріал (скельця чи цитоблок) + копія патогістологічного/цитологічного висновку. Для морфологічної оцінки — скельце, забарвлене гематоксиліном та еозином. |
| Зберігання та транспортування | FFPE-блоки: +8…+25°C, не заморожувати. Скельця та цитоблоки: кімнатна температура, сухе захищене пакування, без механічного пошкодження. |
| Термін зберігання блоку | FFPE-блоки — бажано не більше 5 років від моменту виготовлення; придатність гістологічного матеріалу визначає патолог за якістю тканини та генетик - за якістю та кількістю ДНК. |
Критерії відбракування зразка
До початку ПЛР патолог CSD LAB виконує преаналітичну оцінку матеріалу. Непридатність зразка може бути пов’язана з:
- недостатньою кількістю пухлинних клітин для надійного виявлення мутацій у межах валідованої чутливості тесту;
- вираженим некрозом, крововиливами або малою кількістю життєздатної пухлинної тканини;
- неналежною фіксацією, декальцинацією, термічним ушкодженням чи іншими факторами, що спричиняють деградацію ДНК;
- недостатньою кількістю матеріалу, пошкодженням блока, цитоблока або скелець.
Після виділення ДНК матеріал може бути відхилено через недостатню її кількість, високу фрагментацію, низьку якість або невідповідність внутрішнього контролю ампліфікації. У такому разі може знадобитися інший зразок.
- Як замовити дослідження
| 1 | Консультація перед замовленням (рекомендовано) Порадьтеся з клінічним онкологом. Якщо ви не впевнені, чи достатньо таргетного EGFR-тесту, чи потрібна ширша ДНК/РНК-панель для раку легень, лікар допоможе обрати дослідження відповідно до клінічної ситуації. |
| 2 | Заповнення направлення Заповніть електронне направлення заздалегідь — через особистий кабінет або разом із лікарем. Зазначте діагноз, гістологічний підтип, стадію, попередні лінії терапії, мету тестування та дані про доступний матеріал. |
| 3 | Передача матеріалу Передайте FFPE-блок, цитоблок або цитологічні скельця до лабораторного офісу CSD LAB чи закладу-партнера разом із копією морфологічного висновку та заповненим направленням. Також необхідно попередньо заповнити форму реєстрації матеріалу із зазначенням його номера. |
- Результат і рішення: як результат вплине на лікування
У звіті зазначають, чи виявлено мутацію EGFR у досліджуваних екзонах, і наводять назву виявленого варіанта, якщо його ідентифіковано.
- Позитивний результат — виявлена мутація EGFR. Клінічне значення залежить від конкретного варіанта. Наприклад, делеції 19-го екзону та L858R у 21-му екзоні є визнаними предиктивними маркерами для EGFR-таргетної терапії у відповідних клінічних ситуаціях.
- Негативний результат — у межах можливостей тесту не виявлено досліджуваних мутацій вище аналітичної межі виявлення. Це не виключає рідкісний або неохоплений варіант, інший драйвер пухлини чи низьку частку мутантної ДНК.
- Неінформативний результат — ДНК недостатньої кількості або якості, замала частка пухлинних клітин чи інші характеристики зразка не дозволили отримати надійний висновок.
Виявлення мутації може вплинути на вибір системної терапії. Остаточне рішення залежить від стадії, типу мутації, попереднього лікування, стану пацієнта та актуальних клінічних рекомендацій.
- Методологія та контроль якості (QC)
Дослідження виконується методом ПЛР у режимі реального часу. Метод спрямований на виявлення визначених мутацій EGFR у екзонах 18, 19, 20 і 21 у ДНК, виділеній із пухлинного матеріалу.
Аналітичний ліміт детекції становить 5% мутантної ДНК.
Контроль якості включає перевірку відповідності матеріалу, морфологічну оцінку тканини пухлини, контроль виділення ДНК, внутрішні контролі якості ПЛР-реакції та валідацію результату відповідно до лабораторної методики.
- Суміжні тести та пакети
Часто призначають разом:
- F004 — транслокація ALK методом FISH;
- F002 — транслокація ROS1 методом FISH;
- H236 - Визначення експресії PD-L1 (22С3), чутливість до імунотерапії;
- M378 — EGFR, моніторинг вторинної мутації після терапії;
- M079 — MyControl EGFR, аналіз циркулюючої пухлинної ДНК.
Пакети / комплексні рішення:
- M373 — MyAction Lung, NGS-панель для раку легень;
- M081 — MyAction РНК-панель для раку легень;
- M355 — базова ДНК-панель для раку легень методом ПЛР.
Вибір окремого EGFR-тесту або комплексної панелі залежить від стадії захворювання, доступного біоматеріалу, попереднього лікування та обсягу інформації, потрібної для прийняття клінічного рішення.
- Для лікаря: посилання на гайдлайни/рекомендації
Результат слід інтерпретувати як предиктивний молекулярний маркер, а не як самостійний критерій встановлення діагнозу.
Негативний результат таргетної ПЛР не виключає інші драйверні зміни. За достатньої кількості матеріалу та клінічної потреби широка ДНК/РНК-панель може бути доцільнішою.
Клінічні рекомендації та гайдлайни:
- CAP/IASLC/AMP: молекулярне тестування раку легень для вибору таргетної терапії
- CAP: актуальний перелік настанов з патології та молекулярної діагностики
- NCCN. NCCN Guidelines Version 6.2026. Non-Small Cell Lung Cancer
Діючі клінічні дослідження:
- ClinicalTrials.gov: діючі дослідження EGFR-позитивного недрібноклітинного раку легень — статус набору та критерії участі необхідно перевіряти в картці конкретного дослідження.
FAQ для пацієнта
Чи підтверджує цей аналіз рак легень?
Ні. Діагноз встановлюють за результатами морфологічного дослідження. EGFR-тестування допомагає охарактеризувати вже виявлену пухлину та обрати лікування.
Що означає позитивний результат?
У пухлинному матеріалі виявлено мутацію EGFR. Її клінічне значення залежить від конкретного варіанта.
Що означає негативний результат?
Досліджувані мутації не виявлені вище межі чутливості методу. Інші мутації або драйверні зміни можуть залишатися невиявленими.
Чому матеріал може бути непридатним?
Причинами можуть бути виражений некроз, низький вміст пухлинних клітин, декальцинація, недостатня кількість матеріалу, недостатня кількість або якість ДНК, висока фрагментація ДНК.
