ПЛР GJB2
GJB2 — це ген, мутації в якому є однією з найпоширеніших причин вродженої нейросенсорної туговухості, що призводить до порушення слуху через проблеми з білком коннексином. Це захворювання пов'язане з ураженням внутрішнього вуха, слухового нерва або центральних відділів слухового аналізатора, і для його підтвердження проводиться молекулярно-генетична діагностика.
Що визначає це молекулярно-генетичне дослідження?
Дослідження визначає патогенні та потенційно патогенні генетичні варіанти гена GJB2, який кодує білок конексин-26, що бере участь у функціонуванні клітин внутрішнього вуха.
Досліджувані мутації: G2046T, C1997A.
Клінічні прояви та симптоми нейросенсорної туговухості
Нейросенсорна туговухість характеризується зниженням слуху внаслідок ураження структур внутрішнього вуха, слухового нерва або центральних відділів слухової системи. Прояви можуть бути вродженими або виникати протягом життя.
- зниження слуху різного ступеня — від легкого до глибокого;
- відчуття, що співрозмовники говорять нерозбірливо або «тихо»;
- у дітей — затримка розвитку мовлення та труднощі у формуванні мовних навичок;
- потреба збільшувати гучність телевізора, телефону або інших джерел звуку.
Клінічні покази до проведення дослідження
- наявність нейросенсорної туговухості невідомого походження;
- наявність у сімейному анамнезі спадкової туговухості або випадків втрати слуху в ранньому віці;
- оцінка генетичної природи порушення слуху та уточнення діагнозу;
- генетичне консультування та оцінка ризику передачі спадкової туговухості потомству.
Матеріал і вимоги до зразка
Тип біоматеріалу: венозна кров.
Контейнер: вакуумна пробірка з антикоагулянтом К2-ЕДТА (фіолетова кришка).
Підготовка до дослідження: спеціальних суворих обмежень немає. Рекомендується здавати кров натщесерце (вранці після 8–12 годин голоду) або через 3–4 години після легкого перекусу. Чисту воду можна пити без обмежень. За півгодини до маніпуляції варто уникати стресу, фізичних навантажень та паління.
Умови логістики: кров транспортується в лабораторію за температури +2...+8 °C. Заморожування зразка не допускається.
Варіанти інтерпретації результатів:
| Виявлений генетичний статус | Що це означає? | Клінічні наслідки та рішення |
| Генотип норми | Досліджувані варіанти гена GJB2 не виявлені. Генетичних змін серед досліджуваних варіантів, асоційованих із порушенням слуху, не встановлено. | За результатами досліджених варіантів GJB2 генетичних ознак спадкової нейросенсорної туговухості не виявлено. Водночас негативний результат не виключає інших варіантів у GJB2 або змін в інших генах, пов'язаних із втратою слуху. |
| Гетерозиготне носійство | Виявлено один патогенний варіант у гені GJB2. Для більшості патогенних варіантів GJB2 гетерозиготне носійство не спричиняє аутосомно-рецесивну нейросенсорну туговухість. | Пацієнт є носієм патогенного варіанта. Рекомендоване генетичне консультування, особливо при плануванні сім'ї або наявності спадкової туговухості в родині. |
| Гомозиготне носійство, генотип ризику | Виявлено однаковий патогенний варіант у двох копіях гена GJB2. Біалельні патогенні варіанти GJB2 є причиною аутосомно-рецесивної несиндромної нейросенсорної туговухості. | Результат може підтверджувати GJB2-асоційовану нейросенсорну туговухість у пацієнта з відповідними клінічними проявами. Рекомендовані обстеження та генетичне консультування. |
Методологія та контроль якості (QC)
ПЛР-дослідження базується на ампліфікації специфічних ділянок ДНК із подальшим аналізом наявності чи відсутності конкретних алельних варіантів (мутацій).
Контроль якості включає коректну ідентифікацію зразка, виділення ДНК, оцінку якості ДНК, проведення ПЛР зі спеціальними контролями якості та інтерпретацію результату ПЛР відповідно до валідованої методики.
Для лікаря: корисні ресурси
Молекулярна діагностика генетичних причин нейросенсорної туговухості та трактування виявлених варіантів у GJB2 у CSD LAB виконуються відповідно до актуальних міжнародних рекомендацій:
- GeneReviews — GJB2-Related Autosomal Recessive Nonsyndromic Hearing Loss — сучасна інформація щодо генетичних причин, клінічних проявів, молекулярної діагностики, типу успадкування та генетичного консультування при GJB2-асоційованій нейросенсорній туговухості;
- Рекомендації ClinGen Hearing Loss Expert Panel та ACMG/AMP — стандартизовані підходи до класифікації та інтерпретації генетичних варіантів, асоційованих із порушенням слуху, зокрема варіантів гена GJB2.