Сегодня специализированная лабораторная диагностика онкогематологической патологии с диссеминированным поражением (лейкемии, лейкемизации лимфом) включает комплекс исследований, дополняющие друг друга: морфологические, иммуноцитологические и генетические методы (от цитогенетических, молекулярно-
цитогенетических до секвенирования экзома). Не менее важным после правильного и своевременного установления диагноза является контроль заболевания на всех этапах терапии для оценки ее эффективности, осуществление своевременной коррекции и принятия стратегически правильных терапевтических решений. Это требует от врачей- гематологов дополнительных знаний и повышает потребность в наличии специализированных онкогематологических лабораторий для обеспечения всего необходимого диагностического комплекса. Специалисты недавно созданной лаборатории онкогематологии имеют большой опыт работы в практической сфере здравоохранения, обладают знаниями алгоритмов диагностики при онкогематологической патологии и постоянно совершенствуют свои
знания и навыки, что обеспечивает слаженную работу и понимание между клиницистами и лабораторной службой.
Морфологическая оценка препаратов костного мозга, периферической крови и других материалов является первым этапом оценки их качества и степени поражения для определения типа опухоли. Этот метод имеет высокую степень субъективности, поэтому результат сильно зависит от подготовки и опыта специалиста. Правильно проведенная морфологическая оценка позволяет сузить спектр применения более объективизированных и специфических, но и гораздо более дорогих методов.
Логическим продолжением диагностического алгоритма является применение иммуноцитологического исследования методом мультипараметровой проточной
цитометрии, которая сегодня является основой диагностики острой лейкемии и хронических лимфопролиферативных заболеваний (рис. 1).
Этот метод позволяет проанализировать структуру антигенного комплекса (иммунофенотипа) каждой отдельной клетки, отличить нормальную от атипичной и подсчитать их соотношение. В отличие от морфологической оценки, иммуноцитологическое исследование позволяет определить линейную принадлежность
опухоли и ее тип, что является определяющим в выборе терапевтического протокола. Определенные изменения в иммунофенотипе могут быть прямым отражением уже известных генетических реаранжировок, что позволяет в первую очередь тестировать именно их молекулярно-генетическими методами (рис. 2).
Определение иммунофенотипа и генетических аберраций играет важную роль не только в инициальной диагностике, но и в оценке эффективности терапии на уровне, недоступном морфологическому исследованию. Такая оценка называется определением минимальной остаточной болезни, т. е. это выявление одной лейкемической клетки в массе нормальных с уровнем чувствительности 1:100 000. Учитывая, что только у 30– 40 % пациентов с острой лейкемией на доступном сейчас уровне технологий удается обнаружить аберрации молекулярно-генетическими методами, проточная цитометрия приобретает решающее значение в определении минимальной остаточной болезни. Точность метода полностью зависит от количества параметров, которые одновременно
детектируются на одной клетке, то есть от технических характеристик проточного цитофлуориметра.
Наличие современного оборудования, такого как проточный цитофлуориметр с восемью параметрами флуоресценции, позволяет определить минимальную остаточную болезнь с высокой точностью на основе протоколов, рекомендованных международными исследовательскими группами, в частности EuroFlow и I-BFM-Flow.
Проточная цитометрия может иметь решающее значение при установлении диагноза в тех случаях, когда взятие материала для гистологического исследования невозможно или по жизненным показаниям, либо из‐за локализации опухоли. Наиболее иллюстрированным примером и частой клинической ситуацией могут быть агрессивные опухоли средостения и брюшной полости, такие как Т-лимфобластная лимфома или лимфома Беркитта без поражения костного мозга, но с накоплением жидкости в серозных полостях или поражением периферических лимфатических узлов. Классическими методами диагностики лимфом является гистологическое и иммуногистохимическое исследование, при которых необходимы инвазивные манипуляции, часто с применением общей анестезии. Они предусматривают определенный срок послеоперационного выздоровления и выполняются в течение 7–10 дней. Но в тех ситуациях, когда опухоль перекрывает дыхательные пути (например трахеокомпрессия при лимфоме средостения) или наблюдается олигурия вследствие сжатия почки опухолевой массой (например, при лимфоме Беркитта), и химиотерапию необходимо начать немедленно, иммуноцитологическое исследование клеток из плевральной или брюшной полости позволяет установить диагноз в течение 2 часов после взятия материала, может буквально спасти жизнь пациенту. Другим примером может быть иммуноцитологическое исследование костного мозга при метастазах нейробластомы у детей, у которых проведение гистологического исследования первичной
опухоли невозможно или из-за ее недоступности (например, расположение в ЦНС), или если она не обнаружена с помощью визуализационных методов диагностики (рис. 3). Постоянное развитие знаний о нормальном и патологическом гемопоэзе, их систематизация и создание современных классификаций, совершенствование диагностической аппаратуры и реагентов позволяет выводить из "серой зоны" все больше сложных для диагностики или неясных случаев, позволяет все большему количеству пациентов получать своевременную адекватную и эффективную терапию.
Источник: https://health-ua.com.
